PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  

產(chǎn)品特點: 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實驗結(jié)果重復(fù)性強
擴增性能優(yōu)：擴增效率高，熒光信號強

儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)**的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

470-17-7異土木香內(nèi)酯說明書  isoalantolactone  /酵母細(xì)胞總RNA分離試劑盒20

4684-32-6鴨腳樹葉堿說明書  2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester   /酵母細(xì)胞線粒體分離(活性)試劑盒10

467-55-0海柯皂苷元規(guī)格  Hecogenin   /酵母細(xì)胞線粒體分離(粗提)試劑盒10

466-26-2雪上一枝蒿乙素品牌  BullatineB  /酵母細(xì)胞線粒體DNA萃取試劑盒10/20

466-24-0苯甲酰烏頭原堿廠家  Benzoylaconitine   /酵母細(xì)胞細(xì)胞壁分離試劑盒20
小鼠脂聯(lián)素(human adiponectin)ELISA試劑盒 ，英文名： human adiponectin ELISA Kit  2034-69-7西瑞香素規(guī)格  Daphnoretin

牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA檢測試劑盒Bovinerudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T  177931-17-8三白草酮廠家  Sauchinone

人AP-5復(fù)合物β亞基(PP1030)試劑盒 human PP1030 ELISA Kit  71610-00-9三尖杉寧堿說明書  Cephalomannine

英文名稱MouseIL-2sRαELISAkit小鼠白介素2可溶性受體α鏈(CD25)(IL-2sRα)規(guī)格：96T/48T  5302-45-4三七素品牌  dencichine

冰凍切片總膽高氯酸萘醌(PAN)染色試劑盒50  三七皂苷Fc規(guī)格  Notoginsenoside Fc
人精氨酸酶2(ARG2)試劑盒 Human ARG2 ELISA Kit  104-46-1反式茴香腦說明書  cis-Anethol

Ratangiopoietieceptoie1,ANG-R-Tie1ELISAKit大鼠血管**素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  3,6′-二芥子?；崽瞧放? 3, 6′-Disinapoyl Sucrose

載玻片細(xì)胞有絲分裂NBT顯色檢測試劑盒10/20  人參皂苷Rk1規(guī)格  Ginsenoside Rk1

MouseAlanineAminoansferase,ALT/GPTELISA試劑盒小鼠氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人參皂苷Rg6廠家  Ginsenoside Rg6

小鼠載脂蛋白B100(Apo B100)ELISA試劑盒 ，英文名： Apo B100 ELISA Kit  130567-83-8羅漢果苷III說明書  Mogroside III
豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Schleicheol 2  中文名：  分子式：C30H52O2  度：%

豬血小板衍生生長因子elisa試劑盒   豬血小板衍生生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬血小板衍生生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬血小板衍生生長因子試劑盒、豬血小板衍生生長因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     Piracetam  7491-74-9  中文名：吡拉西坦  分子式：C6H10N2O2 

豬血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Senkyunolide C  中文名：洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H12O3  度：96.0%

豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Senkyunolide C  中文名：洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H12O3 

豬血小板活化因子(PAF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Sarmentocymarin  98633-61-5  中文名：  分子式：C30H46O8
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
對蝦桃拉病毒(TSV)定性試劑盒RT-PCR法三、注意事項
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。